شناسایی و ردیابی ویروس v و s سیب زمینی با استفاده از روش های سرولوژیکی و مولکولی در استان های خراسان رضوی و همدان

به منظور ردیابی ویروس های s و v سیب زمینی در تابستان سال 1386 از مناطق عمده سیب زمینی کاری استان های خراسان رضوی و همدان نمونه برداری صورت گرفت. غده های گیاهانی که علایمی نظیر موزاییک، کلروز و تموج حاشیه برگ را نشان میدادند، جمع آوری شدند و در شرایط خنک به آزمایشگاه منتقل گردیدند. غده ها جهت گذراندن دوره خواب در دمای 4 درجه سانتی گراد در سردخانه قرار گرفتند و سپس جوانه زدند. عصاره تعدادی از نمونه هایی که در آزمون سرولوژیکی das-elisa مثبت ارزیابی شده و در گلخانه کاشته شدند، بر روی گیاهان محک شامل chenopodium quinoa و c. amaranticolor (نقاط کلروتیک روی برگ)، nicotiana debneyi (موزاییک و رگبرگ نواری)، n. occidentalis (رگبرگ روشنی)، n. glutinosa و گوجه فرنگی (موزاییک) مایه زنی شد و علایم ایجاد شده در هر یک با منابع مطابقت داشت و حضور ویروس را تأیید کرد. جهت ردیابی مولکولی، استخراج rna به دو روش فنل-کلروفرم و peg 6000 انجام شد و با استفاده از آغازگرهای اختصاصی مبنی بر ژن کد کننده پروتئین پوششی در واکنش rt-pcr، قطعه ای در محدوده 1118 جفت باز برای pvs و 811 جفت باز برای pvv تکثیر گردید. این اولین گزارش از وجود ویروس pvv در ایران می باشد. همچنین فرآورده pcr مربوط به ویروس s سیب زمینی جهت تعیین توالی به شرکت macrogene کره ارسال و توالی یابی گردید.